叶酸基因MTHFR的T碱基研究

研究背景

MTHFR是亚甲基四氢叶酸还原酶蛋白编码基因，是叶酸代谢与甲硫氨酸代谢中的关键酶。MTHFR的活性主要取决于其C677T多态位点，TT型MTHFR活性降低，叶酸转化能力较弱。MTHFR基因缺陷将导致机体多个基础生化过程的紊乱，包括细胞周期调控、DNA复制、DNA以及蛋白质甲基化修饰等，并进而引发神经管缺陷、癌症、心脑血管疾病等多种病症。

因此，创建一种用于检测叶酸基因MTHFR C667T的检测技术尤为重要。

研究方法

采用ARMS PCR（突变扩增系统），通过引物3'端最后一个碱基与模板碱基是否互补，从而决定是否能够延伸，完成PCR扩增。碱基不互补则不延伸。

在两条ARMS PCR引物（一条检测T型，一条检测C型）的5’端添加两段序列，分别和两种不同荧光标记的探针互补，因此可实现在同一反应中扩增两种基因型的模板，两种模板分别结合不同的荧光探针，通过检测不同的荧光信号可测得相应的基因型。

此方法将ARMS PCR和荧光PCR技术结合，两种基因型的检测引物各添加不同的通用序列，可实现同一反应中检测两种基因型的目的，简化ARMS PCR检测的方法和流程。

研究成果

通过自主研发， 获得2项实用新型专利：一种基因检测装置和一种基因检测用存放装置。

本研究成果可指导受试者科学补充叶酸。通过大样本的检测，我们累积了大量基于中国人群的有价值的MTHFR C667T数据，绘制了全国叶酸T碱基分布图。其中，北方地区叶酸T碱基携带者比例较大。但广东省的检测数据中，珠海与深圳的携带比例高出广东省其他地区，经研究，深圳与珠海为北方人口主要流入地，所以叶酸T碱基占比较高。